Ang manipis na layer ng chromatography ay isang pamamaraan ng pagtatasa ng kemikal batay sa paggamit ng isang sorbent layer na may kapal na 0.1-0.5 mm bilang isang nakatigil na yugto. Ang pamamaraang TLC ay maaaring magamit sa iba't ibang larangan at pinapayagan ang pagpapasiya ng isang iba't ibang mga kemikal na compound.
Prinsipyo ng pamamaraan
Ang pamamaraan ng manipis na layer ng chromatography ay ipinanganak mula sa chromatography ng papel at ang mga unang eksperimento ay natupad noong 80 ng ika-19 na siglo. Ang aktibong paggamit ng pagsusuri na ito ay nagsimula lamang pagkatapos ng 1938.
Ang diskarteng TLC ay may kasamang isang mobile phase (eluent), isang nakatigil na yugto (sorbent), at isang analyte. Ang nakatigil na yugto ay inilalapat at naayos sa isang espesyal na plato. Ang plato ay maaaring gawin ng salamin, aluminyo o plastik - ito ang mga magagamit muli na substrate na dapat na hugasan, tuyo at ihanda para sa paglalapat ng sorbent pagkatapos ng bawat paggamit. Posible ring gumamit ng mga plate ng papel na tinatapon pagkatapos magamit.
Ang silica gel ay madalas na ginagamit bilang hindi gumagalaw na yugto, ngunit posible na gumamit ng iba pang mga sorbents, halimbawa, aluminyo oksido. Kapag ginamit ito o ang sorbent, ang teknolohiya ay dapat na mahigpit na sundin upang maging tumpak ang resulta, halimbawa, dahil ang silica gel ay maaaring magbigay ng isang hindi tamang resulta kung ang hangin sa laboratoryo ay masyadong mahalumigmig.
Ang mga solvents ay ginagamit bilang mobile phase, halimbawa, tubig, acetic acid, ethanol, acetone, benzene. Ang pagpili ng isang solvent ay dapat na responsable, sapagkat ang resulta ng chromatography ay direktang nakasalalay sa mga katangian (lagkit, density, kadalisayan). Ang isang indibidwal na may kakayahang makabayad ng utang ay napili para sa bawat nasuri na sample.
Pagsusuri
Ang sample ay dapat na dilute sa isang pantunaw. Kung ang kumpletong paglusaw ay hindi nangyari at masyadong maraming mga impurities ay mananatili, pagkatapos ang sample ay maaaring malinis sa pamamagitan ng pagkuha.
Ang aplikasyon ng sample sa plato ay maaaring gawin awtomatiko o manu-mano. Gumagamit ang awtomatikong aplikasyon ng isang paraan ng microspray kung saan ang bawat sample ay nai-spray papunta sa naaangkop na lugar ng substrate. Para sa manu-manong aplikasyon, isang micropipette ang ginagamit. Ang mga marka ng lapis ay inilalagay sa plato para sa bawat sample. Ang bawat sample ay inilalapat gamit ang isang capillary sa plato sa isang linya sa isang sapat na distansya mula sa mga marka upang hindi makapag-reaksyon ng carbon mula sa lead.
Ang plato ay inilalagay sa isang sisidlan, sa ilalim ng kung saan ang eluent ay ibinuhos. Ang suporta ay nakalagay na may isang gilid sa daluyan hanggang sa minarkahang linya. Ang daluyan ay mahigpit na sarado upang maiwasan ang pagsingaw ng mobile phase. Sa ilalim ng pagkilos ng mga puwersang capillary, ang eluent ay nagsisimulang bumangon ang sorbent layer. Kapag umabot ang eluent sa isang tiyak na antas, ang plato ay aalisin sa daluyan at pinatuyo.
Kung ang nais na sangkap ay walang kulay, kung gayon hindi ito makikita sa substrate. Samakatuwid, ang visualization ay ginaganap - pagproseso ng plato na may yodo ng singaw o iba pang mga tina.
Matapos ang naturang pagproseso, sinusuri ang resulta. Lumilitaw sa sorbent ang mga may kulay na lugar na may iba't ibang kasidhian. Upang matukoy ang isang sangkap (o isang pangkat ng mga sangkap), ang mga may kulay na lugar, kanilang laki, kalakasan at kadaliang kumilos ay inihambing sa isang sample na sanggunian.
Malawakang ginagamit ang pamamaraang TLC sapagkat ito ay mabilis, mura, tumpak, madaling maunawaan, hindi nangangailangan ng kumplikadong kagamitan, at madaling bigyang-kahulugan.
